Investigación en Monitoreo de Fermentaciones Usando NIR

Me han pedido que se haga el experimento de la semana el jueves debido a que hay algunos con examen el miércoles. Consultando con Julia no se puede ya que el Dr. Romañach estaría disponible o miércoles o viernes. Entonces, de ser así, el experimento lo haríamos el viernes. Hay que dejar todo preparado el jueves y empezar temprano el viernes. No tiene que estar todo el mundo a la vez, se pueden turnar para ayudar. Quiero que estén claros que el Dr. Romañach se ha entusiasmado con el experimento, por lo cual no lo podemos defraudar. Hay que estar temprano allí para poder salir de su lab bastante temprano...y que él mismo pueda irse pronto a su casa.

Entiendo que Ernie logró que el técnico Tito sacacara unas fotos fantásticas de la célula con la proteína, estoy ansioso de verlas.

Angélica, llevé al lab algunas cosas de las cuales te voy a instruir para que efectúes unas purificaciones crudas y uses esa proteína para la curva de calibración del fluorímetro en lo que llega la enzima purificada que ordené. Puedes empezar leyendo el manual de purificación de GFP que dejé con las columnitas.

Lucas, Arnaldo y Ernie, ¿tienen tiempo de ir al lab a las 3:30 pm mañana? Necesito instruírles en cuanto a los análisis de datos, hay todavía por hacer algunas cosas con los datos y en esta semana esos datos también deben ser analizados.

Estoy enviando este mismo mensaje por e-mail.

-L. Saliceti-

¡Hola!

En el aspecto experimental, vamos a efectuar unos cultivos en shaker en el laboratorio del Dr. Romañach, de Química, para poder usar su equipo de NIR. Ya Julia estuvo la semana pasada haciendo pruebas con el NIR y los cultivos de la semana pasada iniciados y estudiados por el grupo. Hay que preparar los cultivo e inóculos el martes, además de que voy a necesitar ayuda para mover el shaker hasta Química.

Les convoco para el martes a las 3:30 pm y también poder discutir sobre el análisis de datos de su último experimento, pues quedan cosas que aparentemente aún ustedes no tienen muy claras. También les exhorto a usar este medio de comunicación, ya que le llega a todo el mundo y no requiere de uso de memoria en los buzones de correo electrónico.

Por favor confirmen la lectura de este blog. De todos modos, enviaré este mensaje por la via del e-mail. Cualquier pregunta favor de hacérmela llegar por el blog.

Queda muy poco para el simposio, ¡hay que trabajar fuerte en esta semanas que vienen!

-Lorenzo-

Ya esto lo habían recibido, pero quiero mantenerlo en el récord de este blog.

Experimentos para la semana (19-23 septiembre)

Angélica, Arnaldo, Lucas & Ernie:

Cultivos en matraces en el shaker para ensayar rangos de concentración del caldo LB de cultivo y tratar de caracterizar usando el modelo de Monod:

Matraces de 250 mL, 100 mL volumen del caldo.
32 grados C
150 rpm (creo que esto es lo que se usó antes)
Usar las siguientes concentraciones de caldo LB:
1. 60 g/L, uno con concentraciones proporcionales de ampicilina y arabinosa, otro con concentración proporcional de ampicilina solamente.
2. 40 g/L, igual que arriba.
3. 20 g/L, igual que arriba.
4. 10 g/L, igual que arriba.
5. 2 g/L, igual que arriba.
6. 0.2 g/L, igual que arriba.
Se debe preparar soluciones en cantidades adicionales de cada concentración de LB para blancos de absorbancia para cada concentración de medio, para diluir muestras de absorbancia > 0.6 y para los inóculos de cada matraz.
Proceder a cultivar en shaker y muestrear cada 2 horas.
Julia llevara de las muestras de > 5 horas al NIR del Dr. Romañach para los espectros.
Se tomarán medidas de célula seca en las muestras de 10, 20, 40 y 60 g/L de LB.

Ernie-debe de contactar a Tito el de microscopía para el uso del microscopio confocal para visualizar la proteína fluorescente en este instrumento y llevarle de las muestras mas densas en células de los cultivos, que supongo serán las de 60 y 40 g/L.

Angélica llevará muestras de los cultivos ya en su fase exponencial al fluorímetro de la Dra. Torres. Esta semana te voy a conseguir una muestra de GFP para hacer la curva de calibración del instrumento y compraré las gradillas de 96 hoyuelos nuevas para tu parte.

Infórmenme que día planean efectuar este experimento para irlos a ver de vez en cuando durante el día y ver el progreso. Yo preferiría que fuese el jueves, pero depende de ustedes.

Disculpen que me comunique de esta manera, pero las pasadas dos semanas han sido muy ocupadas para mí debido al evento de la semana de biotecnología.

Saludos a tod@s! He abierto este foro para intercambiar resultados, ideas, comentarios y otros en relación a la investigación sobre monitoreo de fermentaciones usando la tecnología de NIR. En este foro podemos comunicarnos sin necesidad de utilizar mucho el e-mail y todos nos podemos enterar de asuntos de importancia. No duden en utilizarlo a diario y es el medio que utilizaré en adelante para conectarme con ustedes. Comentarios nuevos son bienvenidos.

Buen día!

-Lorenzo-